Előzmények Podcastok

A Wu Liang szentély - 3D nézet

A Wu Liang szentély - 3D nézet



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

3D kép

Ez a szentély egy bonyolult családi temető része volt a mai Délnyugat -kínai Shandong tartományban, Kínában. Egy kiskorú helyi tisztviselő sírja előtt állt. Ősi falait a történelem és a mitológia jelenetei borítják.

Támogassa a miénkNonprofit szervezet

Weboldalunk nonprofit szervezet. Csak havi 5 dollárért válhat tagjává, és támogathatja küldetésünket, hogy kulturális örökséggel rendelkező embereket vonzzunk be, és világszerte javítsuk a történelemoktatást.


Wuhou templom

A Wuhou templom (Wu márki temploma) Chengdu déli külvárosában a leghíresebb és legbefolyásosabb templom. Nevét Zhuge Liangról kapta, aki 181 és 234 között élt.

Kína egyik híres történelmi személyisége, és a Shu Királyság Liu Bei császár (161-223) híres minisztere és katonai stratégája volt a Három Királyság időszakában Kínában. A templomot Liu Bei császárnak is szentelik.

A Csing -dinasztia idején épült, 1672 -ben. Mivel Zhuge Liang életében megkapta a "Wuxiang Hou" (Wuxiang márki) címet, ez a templom Wuhou emléktemplom néven ismert. A templom Chengdu egyik fő látnivalója, és számos szobrot tartalmaz Liu Bei császár, Zhuge Liang és a Shu Királyság más tisztviselői számára, és vannak ősi feliratok és táblák, amelyek híresek Kínában.

Wu Hou templom

Online kiállítások

Egy kiállítás ökológiája kiállítás kiegészítése A természet nemzete: amerikai művészet és környezet. Használata A természet nemzete hivatkozási pontként ez a weboldal megvizsgálja a kiállítás létrehozásával kapcsolatos néhány kritikus tervezési döntést és azok környezeti hatásait.

Átmeneti hatások megnyitja a művészet és a tudomány találkozásánál a kísérletek széles körű történelmi feltárását. Ez a kiterjedt online kiállítás a tudományok és a művészettörténet szakértőit ​​gyűjti össze, hogy bemutassa Howard Russell Butler napfogyatkozás festményeinek történetét és az azokat létrehozó művész történetét.

A Henry és Rose Pearlman kollekció impresszionista és posztimpresszionista remekműveket mutat be az egyik legszebb gyűjteményből, amelyet még mindig magánkézben tartanak. A gyűjtemény olyan művészek festményeit és szobrait tartalmazza, akik a kor avantgárdjának átalakító tagjai voltak, mint például Cézanne, Degas, Van Gogh, Modigliani és Soutine. Az alkotások a hetvenes évek közepe óta hosszú távra kölcsönadásra kerültek a Princetoni Egyetemi Művészeti Múzeumnak, és egy nagy nemzetközi vándorkiállításon voltak láthatók 2014-2016 között, amelyet egy mobilbarát weboldal kísért, amely 50 modern mesterművet mutatott be a 19. század végén. század elején. A Henry és Rose Pearlman Foundation honlapja további részletes információkat tartalmaz a gyűjteményről.

Princeton Nagy Perzsa Királyok Könyve Irán történetét mesélte el az idők hajnalától az i. sz. Az interaktív a Peck Shahnama hat festményének megragadó történeteit és csodálatos részleteit tárja fel.

Az elveszett és talált városa kiállítás kiegészítéseként jött létre, Az elveszett város: New York, Chicago és Los Angeles elfoglalása, 1960-1980 lehetőséget adni a kiállítás történelmi anyagával, valamint a kortárs városi környezettel.

Fedezze fel a ritka Guercino karikatúra rajzok albuma amely huszonhárom karikatúrarajzot tartalmaz Giovanni Francesco Barbieri (1591–1666) olasz barokk festő által, általában Guercino becenevén ismert, a kiállítás kiegészítéseként 500 év olasz mesterrajz.

New Jersey nem webhely bemutatja New Jersey -t, mint a pop, a koncepcionális, az performansz, a föld és a fekete művészet műfajaiban bekövetkezett jelentős áttörések helyét és katalizátorát 1950 és 1975 között. távolabbi perifériák.

Casting New Jersey: The George Segal Papers a Princeton Egyetemi Művészeti Múzeum és a Princetoni Egyetemi Könyvtár gyűjteményeiből származó nyomatok, rajzok, fényképek, ritka könyvek és folyóiratok válogatásával vizsgálja a művészet és az irodalom modernista forradalmának összetettségét.

1913: A modernizmus éve a Princeton Egyetemi Művészeti Múzeum és a Princetoni Egyetemi Könyvtár gyűjteményeiből származó nyomatok, rajzok, fényképek, ritka könyvek és folyóiratok válogatásával vizsgálja a művészet és az irodalom modernista forradalmának összetettségét.

Princeton és a gótikus ébredés Princeton gótikus újjáélesztési architektúrájának - az egyetem meghatározó vizuális nyelvének - multimédiás feltárása szöveg, hang és képek segítségével. Okos telefonon és számítógépen keresztül érhető el.

Ázsiai Művészeti Gyűjtemény a Múzeum ázsiai művészet több mint hatezer alkotását tartalmazó gyűjteményéből válogat.

A kép visszaállítása röntgen-elemzés alapján nyomon követi Andrea di Bartolo olasz művész lépéseit, amikor megalkotta Madonna és gyermek oltárképét (1410-15. körül).

Kína múltjának felidézése: a "Wu családi szentélyek" művészete, régészete és építészete a Wu Family Shrine interaktív modellje - amelyet 3D modellező szoftver és GPS -leolvasások segítségével hoztak létre - lehetővé teszi, hogy feltárja az ókori Kína egyik leggazdagabb kulturális korszakának alapjait. A 2005. március 5 -től 2005. június 26 -ig megtekinthető kiállítás, a Recarving China's Past: Art, Archeology and Architecture of the Wu Family Shrine című kiállításhoz kapcsolódó linkek eléréséhez kattintson ide.

Az ötödik menny varázslói egy Nahua (közép -mexikói) kerámia ülő istenséget vizsgál, a tömjén égetésére szolgáló edényt, amely betekintést nyújt az ősi mexikói művészetbe és rituális gyakorlatokba.

Zene a Jaguár országából az ősi amerikai kultúrák hangszereit tárja fel, amelyek i. e. 1000 -től virágoztak. a spanyol hódítás kezdetéig 1519 -ben, és lehetővé teszi, hogy kapcsolatot teremtsen a zenei és rituális ikonográfia között.

Félix Candela: mérnök, építő, szerkezetépítő Candela betonépületeit strukturális művészeti alkotásként ábrázolja.

A strukturális tervezés művészete: svájci örökség összehozza a hat svájci mérnököt, akik a huszadik század leglátványosabb strukturális művészeinek csoportját alkotják: Robert Maillart, Othmar H. Ammann, Heinz Isler és Christian Menn.


A Wu Liang szentély - 3D nézet - Történelem

A korai Kína története és régészete

Válogatott régészeti lelőhelyek bibliográfiája

Yaoshan 瑤山 temető
Yaoshan, Yuhang, Zhejiang
(feltárt 1987)

Zhejiang Sheng wenwu kaogu yanjiusuo 浙江省 文物 考古 硏 究 究 所. Yaoshan 瑤山. Peking: Wenwu, 2003.

  1. Chang, Kwang-chih. & quot; Kína a történelmi korszak előestéjén & quot; Cambridge története az ókori Kínában37-73 (60-66).
  2. James, Jean M. & quot; Képek a hatalomról: A Liangzhu kultúra maszkjai. & Quot Tájékozódások 22,6 (1991): 46–55. DS 501 O73 FAL

Erlitou 二 里頭 webhely
Erlitou, Yanshi, Henan
(feltárt 1959-től napjainkig)

Zhongguo shehui kexue yuan kaogu yanjiusuo 中國社會科學院 考古 硏 究 所. Yanshi Erlitou: 1959 nian-1978 nian kaogu fajue baogao 偃師 二 里 里 頭: 1959 年 -1978 年 考古 發掘 報告. Peking: Zhongguo dabaike quanshu, 1999.

  1. Bagley, Robert. & quot; Shang Archeology & quot Cambridge története az ókori Kínában124-231 (158-165).
  2. Chang, Kwang-chih. Az ókori Kína régészete. New Haven: Yale University Press, 1986 (esp. 307-317). DS 715 C38 PCL
  3. Childs-Johnson, Erzsébet. & quot; Az Erlitou -korszak szimbolikus jadei: Xia királyi hagyomány. & quot Az ázsiai művészet archívuma 48 (1995): 64-92. N 7260 A68 FAL.
  4. Fitzgerald-Huber, Louisa G. "Qijia és Erlitou: A távoli kultúrákkal való kapcsolatok kérdése." Korai Kína 20 (1995): 17-67.
  5. Liu, Li „Az elmék és a kezek termékei”: Presztízsáruk gyártása Kína neolitikus és korai korszakában. Ázsiai kilátások 42,1 (2003): 1-40. DS 514 A78 PCL.
  6. Liu, Li. & quot; Települési minták, főnöki változékonyság és a korai államok fejlődése Észak -Kínában. Antropológiai Régészeti Közlöny 15 (1996): 237-288. C 79 E85 J68 PCL.
  7. Liu, Li, & quot; Különleges jelentés: A három dinasztia kronológiájáról. & Quot
  8. Liu, Li és Xingcan Chen. & quot; Városok és városok: A természeti erőforrások ellenőrzése a korai államokban, Kínában. & quot A Távol -Keleti Múzeum értesítője 73 (2001): 5-47. DS 714 S7 PCL.
  9. Shelach, Gideon. & quot; Társadalmi komplexitás Észak -Kínában a korai bronzkorban: összehasonlító tanulmány az Erlitou és az alsó Xiajiadian kultúrákról. Ázsiai kilátások 33,2 (1994): 261-292. DS 514 A78 PCL.
  10. Thorp, Robert L. & quot; Erlitou and the Search for the Xia. & Quot Korai Kína 16 (1991): 1-38.
  11. Zheng, Guang. „Az erlitou -i maradványok és a korai bronz kapcsolata
    A kor civilizációja Kínában. ” Ban ben A kohászat kezdetei Kínában, Katheryn M. Linduff és munkatársai, 215-22. Kínai tanulmányok 11. Lewiston, N.Y .: Edwin Mellen, 2000.

Fu Hao 婦 好 sír (M5)
Yinxu, Anyang, Henan
(feltárt 1928-tól napjainkig)

Li Ji 李 濟, szerk. Anyang fajue baogao 安陽 發掘 報告. 4 kötet. Taibei: Nantian, 1978. DS 793 A577 A572 PCL.

Zhongguo shehui kexue yuan, kaogu yanjiusuo 中國社會科學院 考古 研究所. Yinxu de faxian yu yanjiu 的 發現 與 研究 研究. Peking: Kexue, 1994 (Nem helyszíni jelentés, hanem átfogó felmérés).

  1. Bagley, Robert. & quot; Shang Archeology. & quot Cambridge története az ókori Kínában124-231 (180-208).
  2. Ebrey, Patricia Buckley. "Fuhao Shang sírja." In A kínai civilizáció vizuális forráskönyve (internetes oldal: http://depts.washington.edu/chinaciv/archae/2fuhmain.htm).
  3. Chang, Kwang-chih. "A Shang Társaság An-yangból." In Shang civilizáció, 67-135. New Haven: Yale University Press, 1980.
  4. Chang, K [wang-] C [hih], szerk. Tanulmányok a Shang Régészetről: Válogatott cikkek a Shang Civilizáció Nemzetközi Konferenciájáról. New Haven és London: Yale University Press, 1986. DS 744 I57 PCL.
  5. Haapanen, Minna. & quot; A Royal Royal Consort Fu Hao of the Shang. & quot; In Az emberi hagyomány a premodern Kínában, szerk. Kenneth J. Hammond, 1-13. Az emberi hagyomány világszerte, nem. 4. Wilmington, Del .: Scholarly Resources, 2002.
  6. Childs-Johnson, Elizabeth, szerk. és tr. "Az 5. sír feltárása Yinxuban, Anyangban." Kínai szociológia és antropológia 15,3 (1983)]. HM 1 C45 PCL.
  7. Fong, Wen C. szerk. Kína nagy bronzkora: kiállítás a Kínai Népköztársaságból, New York: The Metropolitan Museum of Art, 1980. NK 7983.22 N48 FAL.
  8. Li, Chi. Anyang Seattle: University of Washington Press, 1977. DS 796 A55 L5 PCL.
  9. Li, Chi. A kínai civilizáció kezdete: Három előadás, amelyek leletekkel illusztráltak Anyangban. Seattle, University of Washington Press, 1957. 913.31 L612B PCL
  10. Linduff, Katheryn. "Az asszonyok életei az ókori Kínában, Anyangban." In In In Pursuit of Gender: Worldwide Archaeological Approaches, szerk. Sarah Milledge Nelson és Myriam Rosen-Ayalon, 257-88. Nemek és régészet sorozat 1. Walnut Creek, Kalifornia: Rowman & amp; Littlefield, Altamira, 2002. CC 72.4 I5 PCL.
  11. Shen, Chen. Anyang és Sanxingdui: Az ókori kínai civilizációk rejtélyeinek leleplezése. Toronto: Royal Ontario Museum, 2002.
  12. Thorp, Robert L. Kína a korai bronzkorban: Shang civilizáció. Philadelphia: University of Pennsylvania Press, 2006. DS 744.2 T46 2006 PCL.
  13. Thorp, Robert L. & quot; A stílus archeológiája Anyangban: 5. sír összefüggésben. & Quot Az ázsiai művészet archívuma 41, 47-69 (1988)]. N 7260 A68 FAL.
  14. Wang, Ying. & quot; rang és hatalom az udvarhölgyek között Anyangban. & quot A nemek és a kínai régészet, szerk. Katheryn M. Linduff és Yan Sun, 95-113. Nemek és régészet sorozat 8. Walnut Creek, Kalifornia: Rowman & amp; Littlefield, Altamira, 2004.

Wei 微 törzsgyűjtemény (J1)
Zhuangbai, Fufeng, Shanxi
(feltárt 1976)

Yin Shengping 尹盛平, szerk. Xi Zhou Wei shi jiazu qingtongqi qun yanjiu 微 氏 家族 青銅器 青銅器 青銅器 群 研究 研究. Peking: Wenwu, 1992.

  1. *Hsu, Cho-Yun és Katheryn M. Linduff. Nyugati Chou civilizáció. New Haven: Yale University Press, 1988 (289-302. Oldal). DS 747 H79 PCL.
  2. Falkenhausen, Lothar von. & quot; Rituális zene a bronzkori Kínában: Archaeological Perspective. & quot; Ph.D. értekezés. Harvard Egyetem, 1988.
  3. Rawson, Jessica. & quot; Nyugat -Zhou régészet & quot; Cambridge története az ókori Kínában352-449 (390-93). DS 741.5 C35 PCL ..
  4. Rawson, Jessica. Nyugat -Zhou rituális bronzok az Arthur M. Sackler -gyűjteményből. Washington: Arthur M. Sackler Foundation Cambridge: Arthur M. Sackler Museum, Harvard University, 1990 (esp. 1, 19-21). NK 7983,2 R39 FAL.
  5. Shaughnessy, Edward L. & quot; A Zhouyuan társadalmi földrajza felé Nyugat -Zhou dinasztia idején: A Fufeng megyei Jing és Zhong vonal. & Quot; Politikai határok, etnikai határok és emberi földrajzok a kínai történelemben, szerk. Nicola Di Cosmo és Don J. Wyatt, 16-34. London és New York: RoutledgeCurzon, 2003. GF 41 P65 PCL.
  6. Shaughnessy, Edward L. & quot; West Zhou Hoards and Family Histories in the Zhouyuan. & Quot Kínai régészet: új perspektívák Kína múltjában a XX. szerk. Xiaoneng Yang, 1: 255-67. New Haven: Yale University Press, 2004. DS 715 N486 FAL.
  7. Shaughnessy, Edward L. "Zhouyuan Oracle-Bone feliratok: belépés a kutatási szakaszba?" Korai Kína 11-12 (1985-1987): 146-194.
  8. *Wu Hung, Monumentalitás a korai kínai művészetben és építészetben (Stanford: Stanford University Press, 1995), 77-99. N 7343,2 W8 FAL.

Zeng Yi márki sírja (Zeng Hou Yi mu 曾侯乙 墓)
Leigudun 擂鼓 墩, Suixian 隧 縣, Hubei
(feltárt 1978)

Zeng Hou Yi mu 曾侯乙 墓. szerk. Hubei sheng bowuguan 湖北省 博物館 és Zhongguo shehui kexueyuan, kaogu yanjiusuo 中國社會科學院 考古 研究所. 2 kötet Peking: Wenwu, 1989.

  1. Régészeti ásatási csapat, Sui Xian Leigudun. & quot; I. sír. Rövid ásatási jelentés Yi Zeng márki sírjáról Sui Xianban, Hubei -ban & quot; Robert L. Thorp. Chinese Studies in Archeology 1.3 (1979-1980) 3-45. DS 715 C46 PCL.
  2. Ebrey, Patricia Buckley. & quot; Yi márki keleti Zhou sírja. & quot A kínai civilizáció vizuális forráskönyve (internetes oldal: http://depts.washington.edu/chinaciv/archae/2marmain.htm).
  3. Falkenhausen, Lothar von. "A Zeng Hou Yi leletek a kínai zene történetében." Zene a Konfuciusz korában, szerk. Jenny F. Tehát, 101-13. Washington, D.C .: Smithsonian, 2000. ML 462 W33 A78 FAL.
  4. Thorp, Robert L. & quot; Sui Xian Tomb: Rethinking the Fifth Century. & Quot Artibus Asiae 43 (1981-82): 67-110. N 8 A75 FAL.
  5. Wang, Zichu. "A hangszerek és emberi áldozatok Yi Zeng márki sírjában." China Archeology and Art Digest 3.2/3 (1999) 105-116.

Baoshan 包 山 M2 sír
Baoshan, Jingmen, Hubei
(feltárt 1992-2001)

Baoshan Chu mu 包 山 楚墓. Szerk. Hubei Sheng Jingsha tielu kaogudui 湖北省 荊沙 鐵路 考古 隊. 2 kötet Peking: Wenwu, 1991.

  1. *Szakács, Constance A. Halál az ókori Kínában: Egy ember útja. Kína
    Tanulmányok 8. Leiden: Brill, 2006. GT 3283 J53 C66 PCL.
  2. Harper, Donald. & quot; A kínai demonológia a harmadik században & quot; & quot; Harvard Journal of Asiatic Studies 45,2 (1985): 459-98. DS 501 H3 PCL és erősítő online.
  3. WANG Baoxuan. & quot; A különböző Guodian Chu összetételének dátumai
    Csúszásszövegek és hátterük, vitával a guodiai randevúkról és
    Baoshan sírok. & Quot A kortárs kínai gondolat 32,1 (2000): 18-42. B 1 C55 PCL.
  4. Hegesztés, Susan. & quot; Chu Law in Action: Legal Documents from Tomb 2 to Baoshan. & quot
    Ban ben Chu meghatározása: Kép és valóság az ókori Kínában, szerk. Constance A. Cook és John S. Major, 77-97. Honolulu: University of Hawai'i Press, 1999. DS 741,65 D44 PCL.

Guodianus M1 sír (és a kapcsolódó kéziratos leletek)
Guodian 郭店, Jingmen 荊門, Hubei
(előkerült kb. 1993)

Jingmen shi bowuguan 荊門 市 博物館. & quot; Jingmen Guodian yihao Chumu & quot; 荊門 郭店 一號 楚墓. Wenwu 文物 1997.7: 35-48. DS 715 W44 PCL.

  1. Allan, Sarah és Crispin Williams, szerk. A guodiánus Laozi: Nemzetközi konferencia kiadványa, Dartmouth College, 1998. május. Early China Special Monograph Series 5. Berkeley: Society for the Study of Early China and Institute of East Asian Studies, California University, 2000.
  2. Boltz, William G. & quot; A negyedik század i. E. Guodiann kéziratok Chuu -ból és az összetétele Laotzyy. & quot Az American Oriental Society folyóirata 119,4 (1999): 590-608. PJ 2 A6 PCL.
  3. Boltz, William G. & quotLiijih „Tzy i” és a Guodiann kéziratos meccsek. & Quot Und folge nun dem, was mein Herz begehrt: Festschrift für Ulrich Unger zum 70. Geburtstag. Szerk. Reinhard Emmerich et al. Hamburger Sinologische Schriften 8. Hamburg, 2002. I, 209-21.
  4. Boltz, William G. & quot; Kéziratok továbbított párjaival. & Quot A korai kínai történelem új forrásai: Bevezetés a feliratok és kéziratok olvasásába, szerk., Edward L. Shaughnessy, 253-83. Berkeley: Society for the Study of Early China és a Kelet -Ázsiai Tanulmányok Intézete, Kaliforniai Egyetem, Berkeley, 1997.
  5. Bumbacher, Stephan Peter. & quot; A legkorábbi kéziratok Laozi A mai napig felfedezték. & Quot Asiatische Studien/Etudes Asiatiques 52,4 (1998): 1175-85. DS 1 A54 PCL.
  6. Cook, Scott. & quot; Fogyasztott művészet és erkölcsi virtuozitás: A Wu xing 五行 esszé és esztétikája. & quot; Kínai irodalom: esszék, cikkek, vélemények 22 (2000): 113-46 PL 2250 C533 PCL.
  7. Cook, Scott. "A vita a kényszeruralomról és az" emberi útról "a közelmúltban feltárt hadviselő államok szövegeinek tükrében." Harvard Journal of Asiatic Studies 64,2 (2004): 399-440. DS 501 H3 PCL és erősítő online.
  8. Cook, Scott. Ellenőrzése A guodiánus Laozi: Nemzetközi konferencia kiadványa, Dartmouth College, 1998. május, szerk. Sarah Allan és Crispin Williams. China Review International 9,1 (2002): 53-65. Halom DS 706 C51115 PCL.
  9. Falkenhausen, Lothar von. & quot; Társadalmi rangsor a Chu sírokban: A hadakozó államok halotti háttere kéziratos leletek. & quot Monumenta Serica 51 (2003): 439-526. DS 701 M6 PCL.
  10. Giele, Enno. & quot; Korai kínai kéziratok: Beleértve a kiegészítéseket és a helyesbítéseket A korai kínai történelem új forrásai: Bevezetés a feliratok és kéziratok olvasásába. & quot Korai Kína 23-24 (1998-99): 247-337. DS 701 E17 PCL.
  11. Giele, Enno. & quot; A korai kínai kéziratok használata történelmi forrásanyagként. & quot Monumenta Serica 51 (2003): 409-438. DS 701 M6 PCL.
  12. Harper, Donald. & quot; A betegség fogalma a korai kínai orvoslásban, újonnan felfedezett i. e. 3. és 2. században Kéziratok. & Quot Südhoffs Archiv für Geschichte der Medizin und der Naturwissenschaften 74 (1990): 210-35.
  13. *Holloway, Kenneth W. Guodian: A kínai vallásos és politikai filozófia újonnan felfedezett magjai. Oxford: Oxford University Press, 2009. Z 6605 C5 H66 PCL.
  14. Ikeda, Tomohisa. & quot; I. szimpózium: A Qu előtti kultúra aspektusai a Chu Slips-ből. & quot Kokusai tōhō gakusha kaigi kiyō 44 (1999): 98-105. CB 253 I5 PCL.
  15. Ikeda, Tomohisa et al. "Könyvek és cikkek bibliográfiája a Kuo-tien Ch'u bambuszcsíkjairól." Acta Asiatica 80 (2001): 72-88. DS 12 A45 PCL.
  16. Liu, Xiaogan. & quot; A bambuszcsúszdáktól a fogadott verziókig: közös jellemzők az átalakításban Laozi. & quot Harvard Journal of Asiatic Studies 63,2 (2003): 337-82. DS 501 H3 PCL és erősítő online.
  17. Pines, Yuri. "Barátok vagy ellenségek: az uralkodó-miniszter kapcsolatok és a hűség fogalmának változása a birodalom előtti Kínában." Monumenta Serica 50 (2002): 35-74. DS 701 M6 PCL.
  18. Pines, Yuri. "Lexikai változások a Zhanguo szövegekben." Az American Oriental Society folyóirata 122,4 (2002): 691-705. PJ 2 A6 PCL.
  19. Szabó, Sándor P. & quotThe Term shenming- Jelentése az ókori kínai gondolkodásban és a közelmúltban felfedezett kéziratban. & Quot Acta Orientalia 56,2-4 (2003): 251-74. PJ 1 A4 PCL.
  20. Taniguchi, Mitsuru. & quot; Ch'u Bamboo Slips a háborúzó államok időszakából és a Ch'u állam történelmi földrajzából. & quot; Acta Asiatica 80 (2001): 27-40. DS 12 A45 PCL.
  21. Xing, Wen. & quot; Guodian Chu Slips: A paleográfiai kérdések és jelentőségük. & quot A kortárs kínai gondolat 32,1 (2000): 7–17. B 1 C55 PCL.
  22. Yi, Sŭng-ryul. & quot; A hűséges lelkészek nézete a Ch'u Bamboo-Slip-ben Lu Mu-kung wen Tzu-ssu a Kuo-tien-től. & quot Acta Asiatica 80 (2001): 52-71. DS 12 A45 PCL.

Qin első császárának mauzóleuma (秦始皇 帝 陵園)
Lintong, Shaanxi

  1. Cotterell, Arthur. Kína első császára: Korunk legnagyobb régészeti lelete. New York: Holt, Rinehart és Winston, 1981. DS 747,9 C47 C67 PCL.
  2. Thorp, Robert. & quot; A Lishan nekropolisz régészeti újjáépítése. & quot Kína nagy bronzkora: Szimpózium, szerk. George Kuwayama, 72-83. Los Angeles: Los Angeles County Museum of Art, 1983. NK 7983.22 G73 FAL.
  3. Sima Qian. "Qin első császára." In A nagy írnok feljegyzései, szerk. William H. Nienhauser, ifj., 1: 127-77. Bloomington: Indiana University Press, 1994. DS 741.3 S6813 PCL.
  4. Kesner, Ladislav. & quot; Senki hasonlósága: (Újra) az első császári hadsereg bemutatása. Művészeti Értesítő 77,1 (1995): 115-132. N 11 C4 FAL.

Lady Dai sírja 軚 (M1)
Mawangdui, Changsha, Hunan

Hunan sheng bowuguan Z 博物館 és Zhongguo kexueyuan kaogu yanjiusuo 中國科學院 考古 研究所 Changsha Mawangdui yi hao Han mu 長沙 馬王堆 一號墓. 2 kötet Peking: Wenwu, 1973. DS 796 C4 H85 PCL.

  1. *Buck, David. & quot; Három Han-dinasztia sír Ma-wang-tui-ban. & quot Világrégészet 7.1 (1975): 30–45. 913.05 W893 PCL & amp online.
  2. Chow, Fong. & quot; Ma-wang-tui: Kincsesbánya a nyugati Han-dinasztiaból. & quot Artibus Asiae 35,1-2 (1973): 5-24. N 8 A75 FAL.
  3. Lai, Guolong. "A gyászrendszer diagramja Mawangduitól." Korai Kína 28 (2003): 43-99. DS 701 E17 PCL.
  4. Qian, Hao. & quot; Han Hanbs Mawangdui, Changsha: Egy arisztokrata család földalatti otthona. & quot; Kína földjéről: régészeti felfedezések a Kínai Népköztársaságban, szerk. Qian Hao, Chen Heyi és Ru Suichu, 87-125. New York: H. N. Abrams, 1981. DS 715 Q513 PCL.
  5. *Wu Hung. & quot; Művészet rituális kontextusban: Mawangdui újragondolása. & quot Korai Kína 17 (1992): 111-144. Oktatótól kapható.

Liu Sheng sírja 劉勝
Mancheng, Hebei

Zhongguo shehui kexue yuan kaogu yanjiusuo 中國社會科學院 考古 研究所 és Hebei sheng wenwu guanli chu 河北省 文物 管理 處. Mancheng Han mu fajue baogao 滿城 漢墓 發掘 報告. 2 kötet Peking: Wenwu, 1980. DS 793 M25 M28 PCL.


Mit érdemes látni a Wuhou templomban?

A Wuhou templom fő teste, az első kapu, a második kapu, a Liu Bei templom, a Zhuge Liang és a Sanyi templom délről északra húzódik. Ezenkívül érdemes meglátogatni Liubei sírját, a Wuhou templom nyugati oldalán.

Háromszoros siker Stele

Liu Bei temploma

A második kapun áthaladva a csodálatos Liubei -templom, más néven Zhaolie -templom áll előtted. A templom közepén Liubei arany szobra áll, és a szobor magassága 3 méter (9,84 láb). Unokájának, Liuchennek a szobra a bal oldalán. Az udvar keleti oldalán a látogatók Guanyu és utódainak szobrait láthatják, míg nyugaton Zhangfei és utódainak szobrait. Zhangfei és Guanyu egyaránt kiváló harcvezérek, akik Liubei szolgálatában állnak. Minden szobor előtt egy kis sztélé áll, amely elmondja a figura és rsquos nevét és élettapasztalatát.

Zhuge Liang temploma

Kerülje el a Zhaolie templomot, és menjen le néhány lépcsőn, és a Zhuge Liang templom láthatóvá válik. Zhuge Liang és három utódgenerációjának szobrai a templom közepén találhatók. A & rsquos azt mondta, hogy a három bronz dob, gyönyörű mintákkal a szobor előtt, akkor készült, amikor ő vezette a hadsereget, és délre vonult, így a három dob Zhege Drum nevet kapta. Tekintse a szemét a templom tetejére, ahol a Zhuge Liang által írt & ldquoAdvice to My Son & rdquo mondat jelenik meg. Ez olvasható & ldquoAz ember nem tud magas eszméket felmutatni egyszerű életmód nélkül.

Sanyi templom

A Sanyi templom három részre osztható: ima, templom és folyosók. Liubei, Guanyu és Zhangfei élénk szobrai a templomban találhatók. A Liu szobor magassága 2,8 méter (9,19 láb), míg Guan és Zhang 2,6 méter (8,53 láb). A magasságkülönbség a császár és a tisztviselők közötti kapcsolatot feltételezi. A fekete stélák két csoportja is létezik: 2,2 méter (7,22 láb) széles és 2,3 méter (7,54 láb) magas.

Liubei sírja (Huiling mauzóleum)

Liubei sírja, a Huiling -mauzóleum a Wuhou -templom nyugati oldalán található. Az & rsquos beszámolt arról, hogy több mint 1700 éves múltra tekint vissza, és nagyon jól megőrzik, és soha nem rongálták meg a mai napig. A sírt kerek téglafal veszi körül, 1825 -ben épült.


Könnyű Al ötvözet tükör gyártása 3D nyomtatási és replikációs módszerekkel

A könnyű tükör gyors gyártásának megvalósítása érdekében AlSi10Mg ötvözet tükröt készítettek 3D nyomtatási és replikációs módszerekkel. Vizsgáltuk a mechanikai, hő- és fizikai tulajdonságokat, a felület pontosságát és a méretstabilitást. Szelektív lézeres olvasztási módszerrel Al -ötvözet tükröt nyomtattak, és kis területi sűrűsége 28,4 kg / m 2 volt. A replikáció révén a tükörfelület pontossága 0,033 λ -ra javult (négyzetes középérték, λ = 632,8 nm), a felületi érdesség 1,3 nm (Ra). A stabilitási teszt eredménye azt mutatta, hogy a 3D nyomtatott tükör jó méretstabilitást mutatott a levegőben hosszú ideig és hőmérséklet -változó környezetben.

© 2018 Optical Society of America

Yang Bai, Zhiyu Zhang, Donglin Xue és Xuejun Zhang
Appl. Dönt. 57(34) F62-F67 (2018)

Geena L. Ferrelli, Hyun I. Kim és Rafael J. Zaldivar
Appl. Dönt. 59(15) 4606-4617 (2020)

Ziqiang Yin és Zhang Yi
Appl. Dönt. 54(26) 7835-7841 (2015)

Tao Zhao, Hao Hu, Xiao-Qiang Peng, Chun-Yang Du, Chao-Liang Guan és Jia-Hao Yong
Appl. Dönt. 58(22) 6091-6097 (2019)

Dan Xie, Xuefeng Chang, Xiayun Shu, Jian Wang, Lifang Mei és Shanming Luo
Dönt. Expressz 24(26) 30264-30274 (2016)

Hivatkozások

Nincs előfizetési hozzáférése ehhez a naplóhoz. Az idézőlisták a kimenő hivatkozási linkekkel csak az előfizetők számára érhetők el. Feliratkozhat akár OSA -tagként, akár intézménye jogosult felhasználójaként.

Lépjen kapcsolatba a könyvtárossal vagy a rendszergazdával
vagy
Jelentkezzen be az OSA Tag -előfizetés eléréséhez

Idézi

Nincs előfizetési hozzáférése ehhez a naplóhoz. A hivatkozások hivatkozva csak az előfizetők számára érhetők el. Feliratkozhat akár OSA -tagként, akár intézménye jogosult felhasználójaként.

Lépjen kapcsolatba a könyvtárossal vagy a rendszergazdával
vagy
Jelentkezzen be az OSA Tag -előfizetés eléréséhez

Ábrák (10)

Nincs előfizetési hozzáférése ehhez a naplóhoz. Az ábrafájlok csak az előfizetők számára érhetők el. Feliratkozhat akár OSA -tagként, akár intézménye jogosult felhasználójaként.

Lépjen kapcsolatba a könyvtárossal vagy a rendszergazdával
vagy
Jelentkezzen be az OSA Tag -előfizetés eléréséhez

Táblázatok (1)

Nincs előfizetési hozzáférése ehhez a naplóhoz. A cikk táblázatok csak az előfizetők számára állnak rendelkezésre. Feliratkozhat akár OSA -tagként, akár intézménye jogosult felhasználójaként.

Lépjen kapcsolatba a könyvtárossal vagy a rendszergazdával
vagy
Jelentkezzen be az OSA Tag -előfizetés eléréséhez

Metrikák

Nincs előfizetési hozzáférése ehhez a naplóhoz. A cikkszintű mutatók csak az előfizetők számára állnak rendelkezésre. Feliratkozhat akár OSA -tagként, akár intézménye jogosult felhasználójaként.

Lépjen kapcsolatba a könyvtárossal vagy a rendszergazdával
vagy
Jelentkezzen be az OSA Tag -előfizetés eléréséhez


A kanonikus Wnt inhibitorok javítják a cisztogenezist egy humán ADPKD egér ortológusban

1 Anhui tartomány PKD Központja, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím: Dianqing Wu, a Yale Egyetem Orvostudományi Karának Farmakológiai Tanszéke, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected]: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

1 Anhui tartomány PKD Központ, Intézet és Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, Kína.

2 Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA.

3 Állami kulcsfontosságú molekuláris onkológiai laboratórium, Rákkórház és Intézet, Kínai Orvostudományi Akadémia és Peking Union Medical College, Peking, Kína.

Cím levelezés: Dianqing Wu, Farmakológiai Tanszék, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA. Telefon: 203.785.3149 E -mail: [email protected] Vagy: Guanqing Wu vagy Chaozhao Liang, Anhui tartomány PKD Központ, Intézet/Urológiai Osztály, Az Anhui Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hefei, Anhui tartomány, 230022, Kína. Telefon: 86.551.62923865 E -mail: [email protected] (G. Wu). Telefon: 86.551.62923856 Email: [email protected] (C. Liang).

Az autoszomális domináns policisztás vesebetegséget (ADPKD) a mutációk okozhatják PKD1 vagy PKD2 gének. Az PKD1 géntermék egy Wnt sejtfelszíni receptor. Korábban megmutattuk, hogy hiányzik a PKD2 géntermék, a PC2, növeli a β-katenin jelátvitelt egér embrionális fibroblasztokban, vese vesehámban és izolált vese gyűjtőcsatorna sejtekben. Azonban továbbra sem világos, hogy a β-katenin jelátvitel szerepet játszik-e a policisztás vesebetegség fenotípusaiban, vagy ha a Wnt inhibitor képes megállítani a ciszták kialakulását az ADPKD betegségmodellekben. Itt genetikai és farmakológiai megközelítéseket alkalmazva kimutattuk, hogy a PC2 hiány okozta emelkedett β-katenin jelátvitel jelentősen hozzájárul a betegség fenotípusaihoz az emberi ADPKD egér ortológusában. Farmakológiailag gátolja a β-katenin stabilitását vagy az érett Wnt fehérje termelését, vagy genetikailag csökkenti a Ctnnb1 (amely β-katenint kódolja), elnyomta a veseciszták kialakulását, javította a vesefunkciót és meghosszabbította a túlélést ADPKD egerekben. Vizsgálatunk egyértelműen bizonyítja a β-katenin jelátvitel fontosságát a kapcsolódó betegségek fenotípusaiban Pkd2 mutáció. Leírja továbbá két Wnt inhibitor, az XAV939 és az LGK974 hatásait a különböző Wnt jelátviteli célpontokra, mint az ADPKD lehetséges terápiás módját, amelyre jelenleg nincs hatékony terápia.

Az autoszomális domináns policisztás vesebetegség (ADPKD) a leggyakoribb az öröklött vesebetegségek csoportjában, amelyet progresszív cisztafejlődés és különböző extrarenális megnyilvánulások jellemeznek (1, 2). Az emberi vesék cisztogenezise fokozatosan elfoglalhatja a vese normális parenchimáját, és veseelégtelenséghez vezethet, amely általában a felnőttkor közepétől későig fordul elő. Ez a betegség a negyedik leggyakoribb egyetlen oka a végstádiumú veseelégtelenségnek világszerte (3, 4).

Az ADPKD -t a mutációk okozzák PKD1 vagy PKD2 géneket, amelyek a policisztin-1 (PC1) és a policisztin-2 (PC2) fehérjéket kódolják. Az ADPKD betegek körülbelül 85% -ában mutációk vannak PKD1, és a fennmaradó 15% -ban mutációk vannak PKD2 (5, 6). Az ADPKD leggyakoribb extrarenális megnyilvánulása az epeutakból származó ciszták kialakulása a májban (2, 7). A májciszták az összes ADPKD -s beteg 83% -ában fordulnak elő, és a májcisztás betegek 94% -a 35 évnél idősebb (8, 9). Az ADPKD egyéb fenotípusai közé tartoznak a hasnyálmirigy ciszták (10, 11), aneurizmák (12 - 15) és az aorta gyökér/mellkasi aorta rendellenességei (16 - 18).

Jelentős előrelépés történt az ADPKD molekuláris mechanizmusainak és patogenezisének tisztázásában (3, 5, 19). A legújabb tanulmányok azt mutatják, hogy az emberi cisztás betegség magában foglalhatja a Wnt jelátvitelt (20 - 22). A Wnt jelátvitel egy erősen konzervált molekuláris útvonal, amely szabályozza a sejtek sorsát, valamint az embriogenezist/organogenezist és a homeosztázist a gerincesekben. Az intracelluláris Wnt jelátvitel kanonikus és nem kanonikus útvonalakba sorolható. Mindkét Wnt jelátviteli utat javasolták kapcsolatba hozni az ADPKD progressziójával állatmodellekben és emberi betegekben (20, 21, 23 - 25). Eddig számos jelentés kimutatta, hogy a vese cisztás megbetegedése a nem -kanonikus Wnt útvonal szabályozatlanságának következménye lehet, ha megzavarja a Wnt/Ca 2+ jelátviteli és/vagy PCP folyamatokat a vesehámsejtekben (23, 26 - 32). A kanonikus Wnt jelátvitel szerepe az ADPKD patogenezisében továbbra is egyértelműen meg van határozva. A transzgénikus egér a β-katenin számára, amely a kanonikus Wnt jelátvitel kulcstényezője, súlyos PKD-fenotípusokat mutat, ami azt jelzi, hogy a β-katenin felszabályozása önmagában elegendő a ciszták kialakulásához a vesében (33). Megszakítása Apc, amely a β-katenin lebomlási komplex kofaktorja, és a túlzott expressziója c-Myc, egy kanonikus Wnt célzástermék, szintén cisztogenezist indukál egérmodellek veséjében (34, 35). Ezenkívül a PC1- és PC2-hiányos sejtek és szövetek spektrumában kimutatták a kanonikus Wnt jelátvitel rendellenes aktiválását (29, 30, 36- 38). Ezek az eredmények közvetlenül vagy közvetve alátámasztják, hogy a kanonikus Wnt jelátvitel hiperaktiválása állatmodellek cisztájának kialakulását okozhatja. Más jelentések azonban azt mutatják, hogy a fokozott kanonikus Wnt jelátvitel nem játszhat kulcsszerepet a PKD cisztogenezisében (25, 28, 31, 39 - 41). Ennek ellenkezőjét találták, mivel a ciszták képződése megzavarhatja a Wnt/PCP homeosztázisát, mivel elveszíti az egyensúlyt a kanonikus és nem kanonikus Wnt aktivitás között (20, 24, 29, 30, 42, 43). Eddig nem végeztek tanulmányokat a kanonikus Wnt jelátviteli gátlás citogenezisre gyakorolt ​​hatásának vizsgálatára egér PKD modellekben.

Számos tanulmány számolt be arról, hogy számos ígéretes gyógyszer számos terápiás hatást mutatott az ADPKD számára számos preklinikai és klinikai vizsgálatban (1, 7, 44-54). Azonban a klinikai vizsgálatokban részt vevők közül néhányan - ezek az ígéretes gyógyszerek közé tartoztak az mTOR inhibitorok (55, 56), a szomatosztatin -analógok (57, 58), az ACEI/ARB (59, 60) és a tirozin -kináz inhibitor (61) - nem gátolták meg a az EGFR csökkenése ADPKD betegeknél. Egyedül a tolvaptánról, a vazopresszin V2 receptor gátlóról kimutatták, hogy mind csökkenti a veseciszták kialakulását, mind javítja a vesefunkciót (54, 62), de a májfunkció károsodását és egyéb mellékhatásokat megkérdőjelezték, hogy széles körben alkalmazzák a klinikán (63, 64). Így továbbra is sürgősen szükség van olyan új gyógyszerekre, amelyek képesek elnyomni a cisztogenezist az ADPKD betegeknél. A Wnt jelátviteli út mentén különböző molekuláris célokkal rendelkező Wnt inhibitorok spektrumát tekintettük, és az XAV939 -et és az LGK974 -et olyan szerként azonosítottuk, amelyek hatékonyan csökkentik a cisztogenezist, javítják a vesefunkciót és meghosszabbítják a túlélést ADPKD állatmodellünkben. Tanulmányunk egyértelmű bizonyítékot szolgáltat a β-katenin jelátvitel fontosságára Pkd2 mutánsokkal kapcsolatos betegségek fenotípusait, és leírja a Wnt inhibitorok XAV939 és LGK974 hatásait a különböző Wnt jelátviteli célpontokra. Ezek a Wnt inhibitorok az ADPKD lehetséges terápiás módszerei, amelyekre jelenleg nincs hatékony terápia.

A kanonikus Wnt jelátvitel kulcsfontosságú tényezője, a β-katenin csökkentése késlelteti a ciszták kialakulását az emberi ADPKD egérmodelljében. Korábban létrehoztunk egy hámsejtspecifikusat Pkd2-kiütéses egérvonal (Vil Cre Pkd2 f/f egerek, más néven Vil-CrePkd2 f3/f3 egerek) keresztezéssel Villin-Cre és Pkd2-bolyhos egerek (37, 65). Ezek Pkd2 mutáns egereknél 1 hónapos koruk előtt kezdenek veseciszták kialakulni, és átlagos élettartamuk 4 hónap (65). A veseszövetek be Vil Cre Pkd2 Az f/f egereknek magasabb az aktív, nukleáris és teljes β-katenin szintje (Ctnnb1) fehérjék (1. ábra, A és B) és Axin2, c-Myc és ciklin D1 fehérjék, amelyeket Wnt célgének termelnek (1., C és D ábra), összehasonlítva a kontroll egerekkel (Pkd2 f/f). Ezek az eredmények összhangban vannak a korábbi jelentésekkel, miszerint a PC2 hiány növeli a Wnt/β-katenin jelátvitelt (27, 37, 66). A β-katenin fontosságának meghatározása a betegség fenotípusaiban a Vil Cre Pkd2 f/f egerek, kereszteztük Vil Cre Pkd2 f/f egerek (65) Ctnnb1 +/– egereket generálni Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egerek (2A. Ábra). Az egyik elvesztése Ctnnb1 allél mentette meg az aktív, nukleáris és teljes β-katenin szintjét a vesékben Vil Cre Pkd2 f/f egerek, szinte a kontroll szintjét csökkentve Pkd2 f/f egerek, amelyek nem rendelkeztek Vil-Cre (1., A és B ábra). Az egyik elvesztése Ctnnb1 allél is csökkentette az Axin2, a c-Myc és a ciklin D1 emelkedett szintjét a kontroll szintre (1. ábra, C és D ábra). A Kaplan-Meier túlélési elemzés azt mutatta Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egerek élettartama lényegesen hosszabb volt, mint Vil Cre Pkd2 f/f egerek (2B. ábra). A szövettan lényegesen kevesebb és kisebb vesecisztát tárt fel Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egerek, mint in Vil Cre Pkd2 f/f egerek (2C. ábra). A mennyiségi szövettani elemzés megerősítette, hogy a Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egerek szignifikánsan alacsonyabb vese cisztás indexet mutattak, mint Vil Cre Pkd2 f/f egerek (2D. ábra). Az Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egereknél is jelentősen javult a vese/testtömeg arány (2E. Ábra), a vesefunkciós paraméterek (2. ábra, F és G) és a vesefibrózis (kiegészítő 1A. org/10.1172/jci.insight.95874DS1) összehasonlítva Vil Cre Pkd2 f/f egerek. Ezek az eredmények együtt azt jelzik, hogy a funkciókiesés miatt emelkedett a β-katenin szint Pkd2 mutáció, hozzájárulnak a betegség fenotípusához. Figyelemre méltó, hogy nem észleltünk különbséget a morfológiában vagy a vesefunkciós paraméterek között Vil Cre Ctnnb1 +/– egerek és kontroll alomtársaik (az adatokat nem mutatjuk be).

Az allél redukció hatásai Ctnnb1 gén. (A és B) Allél redukciója a Ctnnb1 gén csökkentette az aktív, nukleáris és teljes β-katenin szintet. (B) Reprezentatív Western blot szöveti lizátumok a veséiből Pkd2 f/f, Vil Cre Pkd2 f/f, és Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egerek láthatók, (B) a vizsgált szövetek denzitometriai értékeinek normalizált kvantitatív elemzése. (C és D) Allél redukciója a Ctnnb1 gén elnyomja a PC2 hiány által aktivált β-katenin által közvetített transzkripciót (beleértve az Axin2, c-Myc és ciklin D1). Minden adat átlag ± SEM (*P & lt 0,05, **P & lt 0,01, diákok t teszt). Az adatok 3 állatból/csoportból származnak.

Ctnnb1 Az allél redukció javítja az ADPKD fenotípusokat Vil Cre Pkd2 f/f egerek. (A) A generáláshoz szükséges párzási stratégiát bemutató diagram Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egerek. (B) A Kaplan-Meier túlélési elemzés azt mutatta Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egerek szignifikánsan magasabb túlélési arányt mutattak, mint Vil Cre Pkd2 f/f egerek. (C) Vese metszetek reprezentatív szövettana egerekből 1, 2 és 3 hónapos korban. Méretrúd: 600 μm. (D és E) Vese cisztás index és vese/testtömeg arány. (F és G) Vesefunkciós paraméterek: vér karbamid -nitrogén (BUN) és kreatinin (Cr). Adatok be DG átlag ± SD (*P & lt 0,05, **P & lt 0,01, ***P & lt 0,001, n = 5, ANOVA). (H és én) Egy elvesztése Ctnnb1 allél nem befolyásolta a cisztát bélelő hámsejtek apoptózisát, hasított kaszpáz-3 és TUNEL festéssel értékelve. (J és K) Egy elvesztése Ctnnb1 allél csökkentette a cisztát bélelő hámsejtek proliferációját, amint azt a PCNA festés kimutatta. A nyilak pozitív PCNA festést jeleznek. Adatok be H – J átlag ± SD (*P & lt 0,05, **P & lt 0,01, ***P & lt 0,001, n = 3, ANOVA). Méretrúd: 60 μm.

A Wnt/β-katenin jelátvitel részt vesz a proliferáció és az apoptózis szabályozásában (67-70). A cisztát bélelő hámsejtek hasított kaszpáz-3 és TUNEL festéssel történő vizsgálata azt mutatta, hogy a β-katenin allél elvesztése nem változtatta meg az apoptózist (2. ábra, H és I., valamint 1B. Kiegészítő ábra). Azonban a veszteség a Ctnnb1 allél megmentette a cisztát bélelő vesehámsejtek fokozott proliferációját Vil Cre Pkd2 f/f egerek, a proliferáció szinte a kontroll szintre áll vissza (2. ábra, J és K). Ezek az eredmények arra utaltak, hogy a megnövekedett β-katenin felelős a vesehámsejtek proliferációjának növekedéséért Vil Cre Pkd2 f/f egerek.

A XAV939, amely gátolja a kanonikus Wnt jelátvitelt, gátolja a cisztogenezist a Pkd2 mutáns vesékben. Az XAV939 egy tankiráz inhibitor. Az Axin fehérjék stabilizálásával antagonizálja a Wnt jelátvitelt, ezáltal felgyorsítja a β-katenin lebomlását (71). Ban ben Vil Cre Pkd2 f/f egerek, XAV939 kezelés (50 mg/kg i.p. naponta, 3A. ábra) P10-től kezdve csökkentette a β-katenin és Wnt célgéntermékeket a kontroll szintjére Pkd2 f/f egerek (2. kiegészítő ábra, A – D). A β-katenin jelátvitelre gyakorolt ​​hatásával összhangban az XAV939 kezelés jelentősen gátolta a vese cisztogenezisének előrehaladását (3., B és C ábra), csökkentette a vese/testtömeg arányt (3D ábra) és javította a vesefunkciós paramétereket (3. ábra, E) és F) in Vil Cre Pkd2 f/f egerek. Ezenkívül az XAV939 kezelés csökkentette a proliferáló cisztát bélelő vesehámsejtek számát, anélkül, hogy jelentősen befolyásolta volna apoptózisukat (3. ábra, G-J). Fontos, hogy ez a kezelés jelentősen javította a túlélést (3K. Ábra). Ezek az adatok erősen alátámasztják azt a hipotézist, hogy a β-katenin emelkedett a Pkd2 a funkcióvesztéses mutáció hozzájárul a betegség fenotípusához.

Az XAV939 gátolja a ciszták kialakulását Vil Cre Pkd2 f/f egerek. (A) Az XAV939 injekciós ütemezését bemutató diagram. (B) Reprezentatív veseképek és szövettan. Méretrúd: 3 mm (felül) 600 μm (alul). (C – F) Vese cisztás index, vese/testtömeg arány, valamint a vesefunkciós paraméterek, vér karbamid -nitrogén (BUN) és kreatinin (Cr). A bekarikázott pontok azokat az egereket jelölik, amelyekről reprezentatív veseképek és szövettan (B) vették. (G és H) Az XAV939 nem befolyásolta az apoptózist, de (én és J) csökkentette a proliferációt (n = 3). (K) XAV939 jelentősen meghosszabbította a túlélését Vil Cre Pkd2 f/f egerek (P & lt 0,05). Adatok be C – J átlag ± SD (*P & lt 0,05 **P & lt 0,01, ***P & lt 0,001, ANOVA).

Az LGK974, amely gátolja a Wnt jelátvitel másik célpontját, késlelteti a cisztogenezist a Pkd2 mutáns vesékben. Továbbá megerősítettük a fokozott Wnt jelátvitel fontosságát a cisztogenezisben a Wnt biogenezis inhibitor LGK974 használatával, amely szájon át biológiailag hozzáférhető porcupin inhibitor, amely blokkolja a Wnt fehérjék lipid módosítását, ami elengedhetetlen a Wnt aktivitáshoz (72, 73).A XAV939 kezeléshez hasonlóan az LGK974 kezelés (napi 3 mg/kg intragastrikusan) a P30-tól kezdődően (4A. Ábra) csökkentette a β-katenin és a Wnt célgén termékek szintjét Vil Cre Pkd2 f/f egerek (3. kiegészítő ábra, A – D). Az LGK974 jelentősen gátolta a vese cisztogenezisének előrehaladását is (4. ábra, B és C), csökkentette a vese/testtömeg arányt (4D. Ábra), javította a vesefunkciós paramétereket (4., E és F ábra), és csökkentette a proliferáló ciszták számát. -vesehámsejtek bélelése anélkül, hogy befolyásolná apoptózisukat Vil Cre Pkd2 f/f egerek (4. ábra, G – J). Az LGK974 kezelés jelentősen meghosszabbította a túlélést Vil Cre Pkd2 f/f egerek (4K. ábra). Így nagyon hasonló eredményeket kaptunk egy genetikai Ctnnb1 az allél redukció és a kezelés két különálló Wnt -út gátlóval.

Az LGK974 kezelés késleltette a ciszták kialakulását Vil Cre Pkd2 f/f egerek. (A) Az LGK974 kezelési ütemtervet bemutató diagram. (B) Reprezentatív veseképek és szövettan. Méretrúd: 3 mm (felül) 600 μm (alul). (C – F) Vese cisztás index, vese/testtömeg arány, valamint a vesefunkciós paraméterek, vér karbamid -nitrogén (BUN) és kreatinin (Cr). A bekarikázott pontok azokat az egereket jelölik, amelyekről reprezentatív veseképek és szövettan (B) vették. (G és H) Az LGK974 nem befolyásolta az apoptózist, de (én és J) csökkentette a proliferációt (n = 3). (K) Az LGK974 meghosszabbította a túlélést Vil Cre Pkd2 f/f egerek (P & lt 0,05). Adatok be C – J átlag ± SD (*P & lt 0,05 **P & lt 0,01, ***P & lt 0,001, ANOVA).

A Wnt/β-katenin jelátvitel szabályozása a PC2 jelenlététől függ. Korábban vesegyűjtő ductális hámsejtvonalakat hoztunk létre WT és Pkd2 f/ - (genotípusa tekinthető Pkd2 +/–) egereket, és megállapítottuk a Pkd2-semleges sejtvonal (Pkd2 -/ - sejtek) a Pkd2 f/-Cre-expresszáló adenovírust tartalmazó sejtek (37, 74). Megfigyeltük a Wnt riporter gén aktivitásának növekedését és a Wnt célgén fokozott expresszióját Axin2 ban ben Pkd2 -/ - sejtek a -hoz képest Pkd2 +/– sejtek (37). Amikor ezeket a sejtvonalakat LGK974-tel kezelték, az aktív, nukleáris és teljes β-katenin fehérje szintje jelentősen csökkent Pkd2 -/-sejtek (kiegészítő 4A. Ábra) Az Axin2, a c-Myc és a ciklin D1 szintje is csökkent (4B. Kiegészítő ábra). Az XAV939 kezelés ugyanazokat az eredményeket hozta (4. kiegészítő ábra, C és D). Ezek az eredmények arra utaltak, hogy a PC2 autonóm módon elnyomja a Wnt/β-katenin jelátvitelt. Továbbá alátámasztva ezt a következtetést, az siRNS által közvetített β-katenin némítás megszüntette a Wnt riporter gén aktivitásának emelkedését Pkd2 -/ - sejtek (kiegészítő 4E. Ábra).

A PC2 veszteség funkcionális szerepének feltárásához a Wnt/β-katenin jelátvitel aktiválásában a génexpressziót WT és Pkd2 -/ - sejtek. Korábbi következtetéseinket megerősítve azt találtuk, hogy a génexpresszió jelentősen megváltozott a Wnt/β-katenin jelátviteli útvonalban (kiegészítő 5A. Ábra). A génexpressziós elemzés azt is feltárta, hogy megnövekedett a génexpressziója Ctnnb1 és számos Wnt gén Pkd2 -/ - sejtek (kiegészítő 5B. Ábra). A kvantitatív RT-PCR kimutatta, hogy a Ctnnb1, Wnt7a, és Wnt9a ben emelték Pkd2 -/ - sejtek az anyai eredetűekhez képest Pkd2 +/– sejtek (37) (5. ábra, A – C). Annak megerősítésére, hogy a PC2 elvesztése volt felelős a felülszabályozásért Ctnnb1, Wnt7a, és Wnt9a, újra kifejeztük az embert PKD2 ban,-ben Pkd2 -/ - sejtek, és azt találták, hogy ezeknek a géneknek a PC2 nélküli sejtekben megnövekedett expressziója visszatért a PC2 -vel rendelkező sejtekben kifejezett szintre (Pkd2 +/+ vagy Pkd2 +/–) (6. kiegészítő ábra, A – E). PKD2 Az újraexpresszió csökkentette a Wnt célgének expresszióját is Axin2, c-Myc, és Ccnd1 normál szintre (6. kiegészítő ábra, F – H). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a Wnt génexpresszióban észlelt változások valóban a PC2 jelenlététől függtek.

A PC2 hiány szabályozza Ctnnb1, Wnt7a, és Wnt9a kifejezés. (A – C) A XAV939 gátolta a PC2 hiány okozta mRNS szint emelkedését Ctnnb1 de nem Wnt7a vagy Wnt9a. A sejteket XAV939-gyel (2 μM) kezeltük 16 órán keresztül, és az mRNS-szinteket kvantitatív RT-PCR-rel határoztuk meg. (D – F) Az LGK974 gátolta a Pkd2 hiány miatti mRNS szint emelkedés Ctnnb1 de nem Wnt7a vagy Wnt9a. A sejteket 24 órán keresztül LGK974-tel (2 μM) kezeltük, és az mRNS-szintet kvantitatív RT-PCR-rel határoztuk meg. (G) Wnt7a mRNS szintje Pkd2 -/ - a sejteket 48 órával azután mértük Wnt7a siRNS-kezelés kvantitatív RT-PCR-rel. (H) Wnt7a leütés csökkentette a Pkd2 hiány okozta emelkedése Ctnnb1 mRNS. (én) A luciferáz riporter gén aktivitása emelkedett Pkd2 -/ - sejtek. A sejteket luciferáz riporterrel transzfektáltuk LGK974 (2 μM) és/vagy exogén módon tisztított WNT-7a (100 nM/ml) jelenlétében vagy hiányában. A riporter gén aktivitását 24 órával a transzfekció után határozták meg. (J) Ctnnb1 Az mRNS-szintet LGK974 és/vagy exogén módon tisztított WNT-7a jelenlétében vagy hiányában is kvantitatív RT-PCR-rel mértük. (K – M) A BAPTA-AM intracelluláris kalcium-megkötése fokozódott Ctnnb1, Wnt7a, és Wnt9a kifejezés. A sejteket BAPTA-AM (0,4 μM) Ca 2+ kelátképzővel kezeltük 8 órán keresztül. Az adatok átlag ± SEM (*P & lt 0,05, **P & lt 0,01, ***P & lt 0,001, n = 3, Diáké t teszt).

Ezenkívül azt is megvizsgáltuk, hogy a PC2 expressziója szabályozható -e ezen Wnt inhibitorok kezelésével. Az immunfluoreszcencia elemzések azt mutatták, hogy csak a kontroll egér vesében mutat erős pozitív festődést, míg Vil Cre Pkd2 Az f/f és az egér vese XAV939 és LGK974 kezeléssel vagy anélkül nyilvánvalóan alacsony PC2 expressziót mutatott (7A. kiegészítő ábra). Azonban nem észleltek szignifikáns különbségeket a PC2 expressziójában a vesék között LGK974 és XAV939 kezeléssel vagy anélkül (kiegészítő 7. ábra, B és C). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy ezen Wnt inhibitorok kezelése nem változtatta meg a PC2 expressziót in vivo.

A PC2 hiánya szabályozza a Wnt7a és Wnt9a expressziót, függetlenül a β-katenintől. Eredményeink további érvényesítése érdekében kezeltük Pkd2 -/ - sejtek és Pkd2 mutáns egerek az LGK974 és XAV939 Wnt inhibitorokkal. Érdekes módon mindkét Wnt inhibitor elnyomott Ctnnb1 kifejezést, de egyik sem befolyásolta a kifejezést Wnt7a vagy Wnt9a (5. ábra, A – F és 8. kiegészítő ábra, A – F). Sőt, a Ctnnb1 az allél redukció nem befolyásolta az emelkedést Wnt7a vagy Wnt9a kifejezés a PC2 hiánya miatt (8. kiegészítő ábra, G – I), ami arra utal, hogy a Wnt7a és Wnt9a nem függ a β-katenintől. Ezért megvizsgáltuk, hogy gátolják -e Wnt7a (5G. Ábra) megváltoztathatja a PC2-hiányos asszociált β-katenin expressziót. Valóban, némítás Wnt7a kórosan megnövekedett β-katenin szintet mentett meg Pkd2 -/ - sejtek (5H. Ábra). Az eredmény további megerősítése érdekében ezeket a sejteket előkezeltük LGK974 -gyel, és hozzáadtunk tisztított Wnt7a -t. Az eredmények azt mutatták, hogy az exogén tisztítású WNT-7a aktiválta a Wnt/β-katenin aktivitást és növelte a Ctnnb1 mRNS szintek (5. ábra, I. és J), ami arra utal, hogy a Wnt7a felszabályozása lehet az a mechanizmus, amellyel a PC2 elvesztése növeli a Wnt/β-katenin jelátvitelt.

Tekintettel arra, hogy a PC2 egy Ca 2+ -modulált kationcsatorna (27, 75, 76), azt is megvizsgáltuk, hogy a sejtek BAPTA -AM kezelésével végzett kelátképzés az intracelluláris Ca 2+ -ban megváltoztathatja -e a Ctnnb1, Wnt7a, és Wnt9a kifejezés. A Ca 2+ kelát jelentősen megnövelte a Ctnnb1, Wnt7a, és Wnt9a mind a WT vesehámsejtekben, mind a Pkd2 -/ - sejtek (5. ábra, K – M), ami arra utal, hogy a PC2 szabályozza a Ctnnb1, Wnt7a, és Wnt9a expresszióját és az azt követő β-katenin jelátvitelt az intracelluláris Ca 2+ koncentráció modulálásával.

Korábbi vizsgálatok kimutatták, hogy a PC2 a Wnt jelzéssel összefüggésben kalciumbeáramlást indukál, és hogy a PC2 elvesztése megzavarja a polarizációt az irányított sejtmigráció során (27, 37, 76). Ez a tanulmány bemutatta a megnövekedett Wnt/β-katenin jelátvitel fontosságát a policisztás vesebetegség fenotípusaiban, amelyet egy Pkd2 funkcióvesztéses mutáció egerekben. Eredményeink azt sugallták, hogy a veszteség Pkd2 a vesehámsejtekben aktiválja a Wnt/β-katenin jelátvitelt az autokrin Wnt termelés növelése révén (pl. Wnt7a). Úgy tűnik, hogy a PC2 szabályozza a Wnt7a és Wnt9a expresszió az intracelluláris Ca 2+ koncentráció modulálásával, míg a PC2 szabályozhatja Ctnnb1 kifejezése, legalábbis részben, a Wnt génexpresszió. A vesehámsejtekben, Wnt7a nemcsak a β-katenin stabilitását növelte, hanem a Ctnnb1 mRNS szintek A Wnt inhibitorok elnyomták ezt a növekedést. Sőt, a β-katenin alulszabályozása genetikailag vagy XAV939 beadásával, amely kifejezetten gátolja a kanonikus Wnt jelátvitelt, jelentősen csökkent Ctnnb1 expresszió és javult cisztás fenotípusok az ADPKD modellünkben. Eredményeink azt mutatják, hogy a kanonikus Wnt jelátvitel is részt vesz a PC2 hiányából eredő cisztogenezisben.

Azt találtuk, hogy a BAPTA-AM kezelés, amely csökkenti az intracelluláris Ca 2+ -t, hasonlóan aktiválta a Wnt jelátvitelt Pkd2 -/ - vesehámsejtek. Továbbá szinergista hatást figyeltünk meg a kanonikus Wnt jelzésre, amikor Pkd2 -/ - a sejteket Ca 2+ kelátképzővel kezeltük. Ezek az eredmények azt sugallták, hogy a Ca 2+ részt vesz a kanonikus Wnt jelátvitel PC2 hiány okozta aktiválásában (27).

Korábbi tanulmányok azt sugallták, hogy az ADPKD-ben a ciszták kialakulása a ciszta-lumenekbe történő túlzott folyadék-kiválasztás, a cisztát bélelő hám rendellenes proliferációja és a kóros hám-polaritás következménye lehet (1, 3). A gyógyszerek, mint például a vazopresszin, a triptolid, az oktreotid és a rapamicin, ezekben a folyamatokban részt vevő utakat célozzák meg (65, 77 - 79). Bár ezek a jelátviteli modulátorok a cisztogenezis csökkenését mutatták a klinikai vizsgálatok során, nem javítják a vesefunkciót a várt mértékben (55, 56, 58, 80 - 82). Ezen klinikai vizsgálatok közül csak a tolvaptán javította a vesefunkciót jobban, mint a placebo az ADPKD -s betegeknél (62), de klinikai alkalmazását nagymértékben korlátozzák a mellékhatások (63, 64). Jelen tanulmányunk egyértelműen bemutatta a Wnt/β-katenin jelátvitel potenciálját az ADPKD terápiás célpontjaként.

Bebizonyítottuk, hogy a PC2 elvesztése felülszabályozott Wnt7a és Wnt9a in vitro és in vivo. Wnt7a és Wnt9a nemrégiben kimutatták, hogy stimulálják a β-katenin jelátvitelt (83, 84). A két kis molekulájú Wnt inhibitor XAV939 és LGK974 elnyomta a Wnt/β-katenin jelátvitelt, jelentősen meghosszabbította az élettartamot, javította a cisztás fenotípusokat és javította a vesefunkciókat egérmodellünkben Pkd2-asszociált ADPKD (6. ábra és kiegészítő 9. ábra). Jelenleg számos Wnt -gátlót fejlesztenek ki és tesztelnek rákterápiára, köztük az XAV939 -et és az LGK974 -et. Érdekes lesz meghatározni, hogy más Wnt inhibitorok hatékony kezelések az ADPKD modellek vagy betegek számára, és ha a Wnt antagonizálása javíthatja az ADPKD fenotípusokat Pkd1 mutációkat vagy javítja a PKD egyéb formáit. Jelenleg nincs kielégítő klinikai terápia az ADPKD kezelésére. Ezért fontos tesztelni az XAV939 és az LGK974 hatékonyságát, és azonosítani a PC2/Wnt/β-katenin molekuláris útvonalat egy humán ADPKD egér ortológusban, hogy felmérhessük ezen Wnt inhibitorok terápiás beavatkozási lehetőségeit.

A Wnt inhibitorok XAV939 és LGK974 hatása a PC2/Wnt/β-katenin molekuláris útvonalra. A PC2 elvesztése megemeli a Wnt7a és Wnt9a expressziót, ami β-katenin aktivációhoz és β-katenin által közvetített transzkripció aktiváláshoz vezet. Ez végül növeli a vesehámsejtek proliferációját és elősegíti a cisztogenezist. Az XAV939 vagy LGK974 kezelés elnyomja a β-katenin aktivitást, és csökkenti a downstream Wnt jelátviteli faktorok, mint például az Axin2, a c-Myc és a ciklin D1 expresszióját, ezáltal megállítva a rendellenes sejtszaporodást és gátolva a cisztogenezist.

Egér modellek és kezelések. A tanulmányban használt egérmodellek mindegyike C57BL/6J beltenyésztett háttérből származott. Pkd2 f/f egereket (37) tenyésztettünk Villin-Cre -transzgenikus egerek generálása Vil Cre Pkd2 f/f egerek (65). Egerek a -val és anélkül Pkd2 A mutációt a farok genomiális DNS PCR -jével genotipizáltuk, amint azt korábban leírtuk (37). A használt primer párok a Pkd2 f allél 5'-TCTGACTTGCAGACTGTGGG-3 ′ és fordított 5′-AGGTAGGGGAAGGTCAGGGTTGG-3 ′ volt. Az Vil A Cre transzgént genotipizáltuk a PCR termék primerrel történő felerősítésével az egér villin-1 promoter régiójával szemben (előre, 5′-GTGTGGGACAGAGAACAAACCG-3 ′ és fordított, 5′-TGCGAACCTCATCACTCGTTGC-3 ′). Az Ctnnb1 +/− egérvonalat az a keresztezéssel hoztak létre Ctnnb1-lebegő egérvonal (Ctnnb1 tm2Kem vagy Ctnnb1 f2-6) a Jackson Laboratories-tól a Sox2 Cre egérvonal (85).

XAV939 kezeléshez, férfi és nő Vil Cre Pkd2 Az f/f egereket véletlenszerűen két csoportra osztottuk, amelyek DMSO (MilliporeSigma) vagy XAV939 (Selleck) vivőanyagot kaptak 50 mg/kg/nap i.p., a 3A. ábrán bemutatott kezelési protokoll használatával.

Az LGK974 kezeléshez az LGK974 -et 10% (vol/vol) citrátpufferben (pH 2,8)/90% (vol/vol) citrátpufferben (pH 3,0) vagy 0,5% MC/0,5% Tween 80 -ban formulázták, és szájon át adagolva adták be az adagolási térfogat 10 μl/g állati testtömeg (3 mg/kg/nap). Férfi és nő Vil Cre Pkd2 Az f/f egereket véletlenszerűen két csoportra osztottuk, amelyek placebót vagy LGK974 -et (Selleck) kaptak, a 4A.

Sejtvonalak és tenyészet. Az Pkd2 -/ - sejtvonal és anyai eredetű Pkd2 heterozigóta (Pkd2 +/–) sejtvonalat korábban leírták (37). A sejtvonalakat DMEM/F12 -ben tenyésztettük 10% FBS -sel. Az SHVRSC-TRCN 0000012691 (MilliporeSigma) shRNA Lentivírus transzdukciós részecskéket alkalmaztuk a Pkd2 +/− és Pkd2 -/ - sejtvonalak az istálló előállításához Ctnnb1-elnémult sejtvonalak Pkd2 +/− β-cat KD és Pkd2 -/-β-cat KD (kiegészítő 4E. Ábra), az előző vizsgálatunkban leírtakhoz hasonló megközelítés alkalmazásával (86). Alulszabályozni Wnt7a kifejezés benne Pkd2 -/ - sejtvonalak, a sejteket siRNS -sel transzfektáltuk specifikusan egérre Wnt7a vagy negatív kontroll siRNS -sel (mindkettőt a Santa Cruztól vásárolták) a Lipofectamine RNAiMAX Transfection Kit (Invitrogen) segítségével, a gyártó utasításai szerint. A sejteket qPCR segítségével elemeztük 48 óra elteltével.

PKD2 ben újra kifejeződött Pkd2 -/-sejtek a pLV-sfGFP (2A) Puro Lentiviral Vector System (Inovogen) alkalmazásával, teljes hosszúságú emberrel PKD2 nyitott leolvasási keret cDNS konstrukció. A rekombináns vírusokat nagy mennyiségben csomagolták és amplifikálták HEK293 sejtekben, a lentivírus részecskéket tisztították és fertőzésre használták Pkd2 -/ - sejtek a gyártó utasításait követve (Addgene).

Antitestek és reagensek. A következő antitesteket, festőanyagokat és reagenseket használtuk: nyúl poliklonális antiszérum a humán PC2 COOH-terminális D682-V968 ellen (hPKD2-Cp néven), a korábbi vizsgálatainkban leírtak szerint (87) β-aktin elleni antitest (katalógus) A5441), anti-α-tubulin antitest (T5201 katalógus) és DAPI (D9542 katalógus) (MilliporeSigma) Axin2 elleni antitest (katalógus 2151S), anti-c-Myc antitest (katalógus 13987S), PARP-ellenes antitest (9532S katalógus) ), és a hasított anti-kaszpáz-3 (Asp 175) antitest (9664S katalógus) (Cell Signaling Technology) anti-ciklin D1 antitest (katalógus sc-70899, Santa Cruz) anti-aktív-β-katenin antitest (katalógus 05-665 , Millipore Corporation) anti-β-catenin antitest (katalógus 610154, BD Biosciences) anti-proliferáló sejt nukleáris antigén (PCNA) (katalógus ab92552), anti-Ki67 antitestek (katalógus ab58380) és BAPTA-AM (katalógus ab120503) (Abcam ) és a DeadEnd fluorometrikus TUNEL rendszer (G3250 katalógus, Promega). A másodlagos antitestek közé tartozott a Cy3-konjugált kecske anti-nyúl IgG (katalógus AP132C, Millipore Corporation), a peroxidázzal konjugált nyúl anti-egér IgG (katalógus W4021, Promega) és a peroxidázzal konjugált kecske anti-nyúl IgG (W4011 katalógus, Promega). Rekombináns WNT-7a fehérjét vásároltunk a Biolegendtől (katalógus 597902).

Western blot. A friss szöveteket vagy tenyésztett sejteket RIPA pufferben (MilliporeSigma) homogenizáltuk, és a fehérjekoncentrációt BCA vizsgálattal (Pierce) határoztuk meg. A mintákat SDS-PAGE módszerrel elválasztottuk, és elektromosan átvittük egy nylon membránra (Perkin Elmer). A membránt szobahőmérsékleten 4 órán át primer antitestekkel és 1 órán át peroxidázzal konjugált másodlagos antitestekkel inkubáltuk. Az antitesteket fokozott kemilumineszcenciával (Pierce) detektálták. A Western -blot eredményeket számszerűsítettük a célzott fehérjék immunreaktív sávjainak denzitometriai értékeivel, a terhelés -kontrollra normalizálva. Western blot esetén minden mintát két példányban töltöttünk be, és az összes Western blot elemzést legalább háromszor megismételtük. A statisztikai elemzés legalább 3 kísérlet duplikált mintáinak eredményein alapult.

Szövettan, immunfluoreszcencia és Masson trichrome festés. A szövettani és az immunfluoreszcens festési eljárások a korábban leírtak szerint történtek (37, 88, 89). A Masson trichrome festés szabványos protokollt használt. A metszeteket paraffinmentesítettük és 100% alkoholban, 95% alkoholban és 70% alkoholban rehidratáltuk, majd desztillált vízben mostuk. A metszeteket Bouin -oldatban 1 órán át 56 ° C -on újra fixáltuk, 5 percig folyó csapvízzel öblítettük, 10 percig Weigert vas -hematoxilin -oldatával festettük, 10 percig folyó meleg csapvízzel öblítettük, desztillált vízben mostuk, és 10 percig Biebrich skarlátvörös fukszin oldatban festettük. A metszeteket foszfotungsztinsav/foszfomolibdinsavval 10 percig inkubáltuk, majd az oldatot eldobtuk, és a metszeteket közvetlenül anilinkékbe vittük át 5 percig.Ezután a metszeteket desztillált vízzel, majd 1% -os ecetsavval öblítjük 1 percig, majd az oldatot eldobjuk, és a metszeteket desztillált vízben öblítjük, dehidráljuk, tisztítjuk és fedjük le. A mikroszkópiához Zeiss Axioplan 2IE kutatási mikroszkópot és Zeiss Axiovert 200 invertált mikroszkóp rendszert használtunk × 10, × 20 és × 40 objektívvel. A szövettani elemzésekhez Aperio ScanScope rendszert (Leica) használtunk. A digitális grafikákat az ImageScope viewer szoftver 12.1.0.5029 verziójával tekintették meg és elemezték.

Cisztikus index kiszámítása. Egerenként 5 reprezentatív H & ampE képet készítettünk × 200 -as méretben a vese metszetekből Vil Cre Pkd2 f/f egerek, Vil Cre Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– egerek, placebo vagy XAV939/LGK974 kezelt Vil Cre Pkd2 f/f egerek, és a kontroll Pkd2 f/f egerek. A képeket Photoshop szoftverben nyitották meg, szürkeárnyalatossá alakították át és 800 × 598 képpontra méretezték át. A kép fölé rácsot helyeztek, így összesen 1064 egyedi pontot hoztak létre. A cisztahámot és a nem cisztás hámot kettévágó pontokat megszámoltuk, és a cisztás és nem cisztikus hámot kettészelő összes pont százalékát cisztikus indexként számoltuk ki (45).

Szaporodás és apoptózis. A sejtproliferáció vizsgálatához a veséket 4% -os pufferolt paraformaldehidben (MilliporeSigma) rögzítettük, paraffinba ágyaztuk, és egy mikrotómra metszettük. A metszeteket deparaffinizáltuk, rehidratáltuk, és PBS -ben 3 -szor 5 percig mostuk. Az epitópokat citrátpufferrel (pH 6,0) végzett mikrohullámú lehívással leplezték le. A metszeteket ezután 10% -ig 3% -os hidrogén -peroxidba merítettük az endogén peroxidáz inaktiválásához, PBS -sel háromszor 5 percig mostuk, és 2% BSA -val blokkoltuk 1 órán keresztül. A metszeteket ezután egy éjszakán át inkubáltuk anti-PCNA és anti-Ki67 antitestekkel 4 ° C-on, inkubáltuk Cy3-konjugált kecske nyúlellenes másodlagos antitesttel, és DAPI-val festettük a sejtmagok azonosítására. A proliferációt úgy mértük, hogy megszámoltuk a PCNA- és Ki67-pozitív magokat a cisztát bélelő hámon. A magokat minden mintában 3 véletlenszerűen kiválasztott nagy teljesítményű mezőben (× 20) számláltuk.

Az apoptózist a DeadEnd Fluorometric TUNEL kit (Promega) és a hasított kaszpáz-3 antitest segítségével detektálták a gyártó utasításai szerint. A vesemintákat lemezekre helyeztük, deparaffinizáltuk és rehidratáltuk, 4% -os formaldehidben PBS -ben fixáltuk 15 percig, majd Proteinase K -vel (katalógus 740506, Macherey Nagel) 10 percig permeabilizáltuk. PBS -ben való mosás után a mintákat egyensúlyba hozzuk és 60 percig címkézzük. A mintákat ezután × 2 SSC -be merítettük, hogy megállítsuk a reakciót, és DAPI -val ellenfestjük. Pozitív apoptózis jeleket detektáltunk fluoreszcens mikroszkóppal. Az apoptotikus sejteket ugyanúgy számoltuk, mint a proliferációs markereket.

Vér karbamid nitrogén és kreatinin mérése. A Pekingi Unió Orvostudományi Főiskola Intézményi Állatgondozási és Használati Bizottság előírásait követve minden egeret izofluránnal érzéstelenítettek a szívlyukadás előtt. A vérmintákat centrifugáltuk, és a szérumokat összegyűjtöttük. A vér karbamid -nitrogén/kreatinin szintjét a Kínai Orvostudományi Akadémia Rákkórház klinikai laboratóriumában elemezték.

Microarray elemzés, qPCR vizsgálatok és útvonal elemzés. A teljes RNS -t kivonták a WT -ből és Pkd2 -/ - sejtvonalak Trizol reagenssel (Invitrogen) a gyártó utasításai szerint. Az izolált teljes RNS mintákat az RNeasy Mini Kit (Qiagen) segítségével tisztítottuk, és minden mintához 50 μg teljes RNS -t küldtünk a Vanderbilt Egyetem Microarray Core létesítményébe. Röviden, 10 μg jelzett cRNS mintákat hibridizáltunk Affy Mouse MOE430 tömbre (45 101 különböző génszonda, Affymetrix) szabványos Microarray Core és Affymetrix protokollok használatával. A beolvasott nyers adatképeket a GeneChip Operating Software 1.4 szoftverrel dolgoztuk fel. A szonda beállított jel intenzitását előfeldolgozták és normalizálták a Vanderbilt Microarray Shared Resource létesítményben. A TIGR MeV program segítségével azonosítottak egy felügyelet nélküli hierarchikus klasztert kiválasztott proliferációs/apoptózis- és Wnt-asszociált génekkel.

A qPCR esetében a teljes RNS -t izolálták transzgenikus és WT egerek szöveteiből Trizol (Invitrogen) alkalmazásával. A cDNS -t a teljes RNS -ből (2 μg) állítottuk elő a SuperScript II reverz transzkriptáz segítségével, a gyártó protokollja szerint (Invitrogen). Az elemzéshez használt primer párok (előre) 5′-CACCTCCCAAGTCCTTTATGAATG-3 ′ és (fordított) 5′-AGCGTCAAACTGCGTGGATG-3 ′ egérhez Ctnnb1, (előre) 5′-CCTGGACGAGTGTCAGTTTCA-3 ′ és (hátra) 5′-ATCGCATAGGTGAAGGCAGC-3 ′ egérhez Wnt7a, (előre) 5′-GACAACCTCAAGTACAGCAG-3 ′ és (hátra) 5′-TTCCACTCCAGCCTTTATCAC-3 ′ egérhez Wnt9a, és (előre) 5′-GACCACAGTCCATGCCATCAC-3 ′ és (hátra) 5′-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3 ′ GAPDH mRNS -betöltés -vezérlésként. A PCR termékeket 1,5% agaróz gél elektroforézissel választottuk el. A kvantitatív PCR-t az iCycler iQ valós idejű PCR-érzékelő rendszerrel végeztük az iQ SYBR Green Supermix készlettel (Bio-Rad).

Az útvonal -elemzéshez génkészlet -dúsítási elemzést (GSEA) (http://software.broadinstitute.org/gsea/msigdb) használtak, hogy kikövetkeztessék a WT és Pkd2 -/ - sejtek. A GenBank csatlakozási számok (NM_013630, BB249222, AI182499, AK004683, AB072311, AB073819, NM_007614, NM_007631, BC006728, AV213413, AK004781, AI323642, BB086994, BB067079, BB398993) a GSEA, hogy csoportosítsa az interakciós hálózatokat és a különbözőképpen expresszált gének biológiai funkcióit. A jelentőség (P átfedés értéke) Fisher pontos tesztjével számítottuk ki.

Luciferáz riporter vizsgálat. Pkd2 +/− és Pkd2 -/-24 lyukú tenyésztőlemezeken nevelt sejteket (37) átmenetileg transzfektáltunk LEF riporterplazmiddal (30 ng), LEF plazmiddal (30 ng), LacZ plazmiddal (160 ng) és GFP plazmiddal (30 ng). DNS-t (1 μg) adtunk minden lyukhoz, és a sejteket szérumtartalmú tápközegben tartottuk. A luciferáz aktivitást luciferáz vizsgálati rendszer (Promega) és luminométer segítségével határozták meg a gyártó előírásainak megfelelően. A luciferáz aktivitást a LEF riporterrel minden sejtvonalra GFP -re normalizáltuk, és statisztikailag elemeztük.

TOPflash luciferáz riporter vizsgálat. Pkd2 +/– és Pkd2 -/-a 12 üregű tenyésztőlemezeken nevelt sejteket (37) átmenetileg transzfektáltuk vagy a TOPflash TCF riporterplazmiddal (0,2 mg), vagy a FOPflash riporterplazmiddal (0,2 mg), amely mutált TCF/LEF-kötő helyet hordozott. DNS-t (1 μg) adtunk minden lyukhoz, és a sejteket szérumtartalmú tápközegben tartottuk. A sejteket 24 órával a transzfekció után 100 μl sejtlízis pufferben (Promega) gyűjtöttük össze. A luciferáz aktivitást luciferáz vizsgálati rendszer (Promega) és luminométer segítségével határozták meg a gyártó előírásainak megfelelően. A TOPflash -el végzett luciferáz aktivitást minden sejtvonalra FOPflash segítségével normalizáltuk, és statisztikailag elemeztük.

Statisztika. A minimális csoportméreteket teljesítményszámításokkal határozták meg a DSS kutatói eszközkészlet használatával, 0,05 α és 0,8 teljesítmény mellett. Az állatokat vak nélkül csoportosították, de randomizálták, és a kutatók a legtöbb minősítési kísérlet során vakok voltak. Egyetlen mintát vagy állatot sem zártak ki az elemzésből. A statisztikai tesztek elvégzése előtt megvizsgáltuk az adatokra vonatkozó feltételezéseket, beleértve a normál eloszlást és a kísérleti csoportok közötti hasonló eltéréseket. Két csoport összehasonlítását páratlan kétfarkúak végezték t teszt, és több mint két csoport összehasonlítását 1-utas ANOVA-val végeztük, majd Bonferroni post-hoc tesztjét Prism 6.0 szoftver (GraphPad) segítségével végeztük. A statisztikai vizsgálatok biológiai ismétléseket használtak. A P a 0,05 alatti értéket statisztikailag szignifikánsnak tekintették.

Tanulmány jóváhagyása. Minden állatkísérletet a Pekingi Unió Orvosi Főiskola Intézményi Állatgondozási és Használati Bizottsága által jóváhagyott protokollok szerint végeztünk.

A GW, a DW és a CL tervezte és tervezte a kísérleteket. AL, YL, YX, SF, JM és XS végezte a kísérleteket. AL, YX, SF, JM, XS, LZ, XZ, QX, DW és GW elemezte és értelmezte az adatokat. AL, GW és DW írta a kéziratot.


L1 és B1 megismétli a kromatin térbeli szerveződését

A háromdimenziós (3D) kromatin szerkezetek kiterjedt feltérképezése ellenére a genom hajtogatásának alapelvei ismeretlenek. Itt az L1 és B1 retrotranszpozonok alapvető szerepéről számolunk be a makroszkopikus 3D genomszerkezet kialakításában. A B1 és az L1 ismétlődő homotípusos csoportosulása a nukleáris belső térben, illetve a nukleáris és a nukleáris perifériákon egymástól kizáró nukleáris rekeszekké bontja a genomot. Az L1 és B1 térbeli elkülönülése konzerválódott az egér és az emberi sejtekben, és dinamikusan következik be a 3D kromatin szerkezetének kialakításakor a korai embriogenezisben és a sejtciklusban. Az L1 átiratok kimerülése drasztikusan megzavarja az L1 és B1 gazdag rekeszek térbeli eloszlását. Az L1 transzkriptumok erősen kapcsolódnak az L1 DNS -szekvenciákhoz, és a HP1α heterokromatin fehérje fázisszétválasztását idézik elő. Eredményeink azt sugallják, hogy a genomiális ismétlődések a kromatin makrostruktúrájának tervrajzaként működnek, ezáltal megmagyarázzák a kromatin konzervált magasabb rendű szerkezetét az emlőssejtekben.


A 3D nyomtatott milliméterhullámú és terahertzes passzív eszközök áttekintése

A 3D nyomtatási technológia napjainkban felkelti a figyelmet. Ennek bizonyos előnyei vannak a hagyományos gyártási eljárásokkal szemben. Krónikus áttekintést adunk a 3D nyomtatási technológiáról a feltalálástól kezdve. Ezt a technológiát használták milliméterhullámú (mmWave) és terahertz (THz) passzív eszközök gyártására is. Bár ígéretes eredmények bizonyultak, a kihívás a gyártási tűrőképesség javításában rejlik, mint például a mérettűrés és a felületi érdesség. Javasoljuk a nagyrendű eszközök tervezési módszertanát a mérettűrés megkerülése érdekében, és javasoljuk a 3D nyomtatott eszközök felületi érdességének specifikus modellezését. Úgy gondolják, hogy a 3D nyomtatási technológia és az anyagtudomány és a gépipar kapcsolódó témáinak fejlesztésével a 3D nyomtatási technológia az mmWave és a THz passzív eszközök gyártásának főává válik.

1. Bemutatkozás

A terahertzes (THz) hullámokat vagy szubmilliméteres/távoli infravörös hullámokat 0,1 és 10 THz közötti frekvenciájú elektromágneses (EM) sugárzásnak nevezzük. Ezek lefedik az EM spektrum nagy részét a közepes infravörös és a mikrohullámú sávok között. Ennek a spektrális tartománynak alacsony frekvenciájú kristályrácsos rezgései és más molekulák közötti rezgései vannak számos kémiai és biológiai anyagban, beleértve a robbanóanyagokat, gyógyszereket és más biomolekulákat. Számos poláris gáznak is megvan a jellegzetes ujjlenyomata a THz spektrumban. Ezen anyagok elnyelt és visszavert THz hullámai olyan információkat tartalmaznak, amelyek más frekvenciatartományokban nem állnak rendelkezésre. Ezért a THz -t széles körben kutatják az érzékelő és képalkotó alkalmazások számára. Az érzékelés és képalkotás lehetséges módszereként a THz biztonságosnak tekinthető, mivel képes áthatolni olyan akadályokon, mint a papír, textil, kerámia, fa és bőr, elhanyagolható csillapítással. A THz technológiákat a célpontok nem invazív és roncsolásmentes érzékelésére is használják. A közelmúltban megvizsgálták a THz spektroszkópiát és a robbanóanyaggal kapcsolatos komponensek képalkotását védelmi célokra.

Összehasonlítva a viszonylag jól fejlett technológiákkal és a mikrohullámú, közepes infravörös és optikai sávokban elterjedt alkalmazásokkal, a THz sáv kutatása, tervezése és technológiai fejlesztései még gyerekcipőben járnak. A THz rendszer különféle aktív és passzív komponensekből épül fel. Az antenna és más passzív eszközök esetében méreteik általában arányosak a hullámhosszal. A THz EM hullámok hullámhossza 3 mm -30 tartományban van μm, amely nagyon kis profillal ruházza fel a THz passzív eszközöket. Az eszköz méretének kis eltérése a funkcionális sáv nagy eltolódásához vezethet. Következésképpen a THz antenna és a passzív eszközök gyártása kifinomult, szigorú mérettűrési folyamatot igényel. Ezenkívül a felületi érdesség a másik ugyanolyan fontos döntő tényező a THz antenna és a passzív eszközök esetében. A nagy felületi érdesség növeli a beszúrási veszteséget. Így a THz passzív eszköz gyártási folyamatához nagyon sima felületkezelésre van szükség.

A THz passzív eszközök hagyományos gyártási módszerei a számítógépes numerikus vezérlésű (CNC) megmunkálás és az elektromos kisülési megmunkálás (EDM) [1, 2]. A CNC eljárás számítógéppel vezérelt precíziós szerszámgépeket használ az alkatrészek kivágására ömlesztett anyagból, amelyben az anyagfelhasználás alacsony. Ezenkívül a CNC -folyamat megköveteli a kezelőtől, hogy elegendő tapasztalattal és készségekkel rendelkezzen, ami kétségtelenül növeli a munkaerő költségeit. Az EDM elektromos kisüléssel maratja a munkadarabokat a kívánt formába, amelyet általában szuperkemény anyagok (például titánötvözetek, szénacélok és cementált karbidok) megmunkálására használnak. Gyártási tűrése sokkal szigorúbb, mint a CNC eljárásé, de a feldolgozási ciklus hosszabb és a feldolgozási költség magasabb. A fent említettek alapján a magas munkaköltség, a hosszú feldolgozási ciklus és a hagyományos eljárás alacsony anyagfelhasználása a fő oka a THz passzív eszköz magas költségeinek. A THz -eszközök nagy kereslete és megfizethetetlen költsége közötti ellentmondás sürgős megoldandó probléma mind a tudományos életben, mind az iparban.

Annak érdekében, hogy megfeleljen a nagy pontosságú megmunkálás követelményeinek és csökkentse gyártási költségeit, a 3D nyomtatási technológiát elkezdték használni a THz készülékek gyártásában. Alkalmazásainak többségét passzív eszközök, például hullámvezetők, kürt antennák és üreg alapú alkatrészek gyártásának tekintik. A 3D nyomtatási technológia por vagy folyadék alapú anyagokat használ fel az alkatrészek rétegenkénti felépítéséhez. A hagyományos szubtraktív gyártási (SM) eljárásoktól eltérően a 3D nyomtatás egy additív gyártási (AM) folyamat, amely környezetbarát, alacsony költségű, alacsony energiafogyasztású és rendkívül rugalmas, valamint rövid feldolgozási ciklusú. A következő előnyökkel rendelkezik:

Hatékony anyagfelhasználás: a szinterezetlen vagy formázott nyersanyagok többször is felhasználhatók

kevésbé igényes a kezelő tapasztalataira és ezáltal alacsonyabb munkaerőköltséget jelent

nagy rugalmasság: képes olyan komplex szerkezet megvalósítására, amelyet hagyományos eljárásokkal lehetetlen elkészíteni, ami nagyobb rugalmasságot biztosít a tervezőknek

rövid átfutási idő: kiküszöböli a szerszámot és a forma előkészítési idejét, így a feldolgozási ciklus rövidebb.

Ebben a cikkben megvizsgáljuk a 3D nyomtatási technológia alkalmazását THz antennák és passzív eszközök gyártásához. Először is áttekintjük a 3D nyomtatási technológia történetét. Ezután bemutatják a 3D nyomtatású mmWave és THz passzív eszközöket. Harmadszor, kitérünk a 3D nyomtatott mmWave és THz passzív eszközök teljesítményének kulcsfontosságú tényezőire, amelyek a felületi érdesség és a mérettűrés. Végül a dolgozatot a 3D nyomtatási technológia mmWave és THz passzív eszközgyártáshoz történő felhasználásának fejlődési trendjével kapcsolatos kilátásokkal zárjuk.

2. A 3D nyomtatási technológia története

Általában a 3D nyomtatási technológiákat a folyamatok és a fémes és dielektromos anyagok tekintetében kötés és lerakás kategóriába sorolhatjuk. Az 1. ábra a 3D nyomtatási technológia történetét mutatja be 1980 -as feltalálása óta, amikor a Kodama szabadalmat alkalmazott a gyors prototípusok készítésére (RP). 1986 -ban szabadalmat adtak ki a Hull számára a sztereolitográfiai készülékről (SLA) [3]. 1992 -ben Deckard és mtsai. szabadalmat nyújtott be a szelektív lézeres szinterezésre [4]. Crump 1992 -ben szabadalmat nyújtott be az olvasztott lerakódás modellezésére (FDM) [5]. Az ARCAM -ot 1997 -ben hozták létre az elektronnyaláb -olvasztási (EBM) technológia kifejlesztésére [6]. Az MCP Technologies 2000 -ben vezette be a szelektív lézerolvadást (SLM) [7].


Absztrakt

A csatorna szerkezetű (AOMC-CS) aktivált rendezett mezopórusos széneket sikeresen előállították CO bevezetésével2 aktiválás a megrendelt mezopórus szén C-FDU-15-en. Megállapítást nyert, hogy a C-FDU-15 prekurzor folyamatos szén-dioxid-keretének fontos szerepe van a kapott AOMC-CS rendelési struktúrájának megőrzésében. Az enyhe aktiválás (pl. 31 tömeg % kiégés) nem rontja a sorrend mértékét. Ezt követően a megrendelési fokozat fokozatosan csökken a tovább növekvő kiégéssel. A C-FDU-15 alapvető hatszögletű mezostruktúrája azonban még mindig megtalálható az AOMCs-CS-ben, ha a kiégés akár 73 tömeg %, bár sok szénfalat lyukasztanak ki, és így sok nagyobb mezopórus és marcropóra keletkezik. A növekvő kiégéssel a mikropórusok felülete és térfogata először növekszik, majd csökken, és a mezopórusok felülete és térfogata folyamatosan növekszik. Az AOMCs-CS legmagasabb mért Brunaruer-Emmett-Teller (BET) felülete, mikropórus térfogata és teljes pórus térfogata eléri a 2004 m 2 /g, 0,50 cm 3 /g és 1,22 cm 3 /g értéket.

Anyagtudományi Intézet, PCFM Laboratórium, Kémiai és Vegyészmérnöki Iskola.

Kinek kell címezni a levelezést. Telefon: +86-020-84114527. Fax: +86-020-84115112. E-mail: [email  protected]


Absztrakt

A háromdimenziós (3D) grafén-összeszerelt monolitok (GA), különösen azok, amelyeket önálló összeszereléssel készítenek a folyékony fázisban, ígéretes formákat képviselnek a grafén gyakorlati alkalmazásainak megvalósításához, nagy felületfelhasználásuk és működőképességük miatt. A 3D GA -k, mint a szén -anyagok új osztálya, összeszerelési folyamatának és szerkezetének vezérlése azonban meglehetősen nem megfelelő. Ebben a perspektívában bemutatjuk az összeszerelési folyamatot, és megvitatjuk a 3D GA -k struktúrájának ellenőrzésében szerepet játszó kulcsfontosságú tényezőket, hogy előkészítsük az utat a jövőbeni alkalmazásaik előtt. Bemutatjuk, hogy az összeszerelési folyamat a fázisszétválasztással kezdődik, amely felelős a 3D hálózatos szerkezet és a folyékony fázis kialakításáért, mivel a távtartók elkerülik a grafénrétegek párhuzamos átfedését, és segítenek egy összekapcsolt pórusrendszer kialakításában. A jól szabott grafénlapoknak és a kiválasztott szerelőanyagoknak előfeltételnek kell lenniük a jól irányított összeszerelési folyamathoz és a 3D GA mikrostruktúrájához. A nagy sebességű és nagy térfogatú energiasűrűséggel rendelkező energiatárolási potenciális alkalmazások igazolják a 3D GA -k előnyeit a valós alkalmazásokban.


Nézd meg a videót: form part 2 (Augusztus 2022).